水稻线粒体tRNATrp的种属特异性氨酰化 |
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引用本文: | 金晓玲,陶志坚,贾捷,何新霞,金由辛.水稻线粒体tRNATrp的种属特异性氨酰化[J].科学通报,2006,51(7):827-832. |
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作者姓名: | 金晓玲 陶志坚 贾捷 何新霞 金由辛 |
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作者单位: | 1. 浙江师范大学化学与生命科学学院,金华,321004;中南林学院环艺学院,长沙,410004 2. 浙江师范大学化学与生命科学学院,金华,321004 3. 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,分子生物学国家重点实验室,上海,200033 |
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基金项目: | 致谢 本工作为浙江省自然科学基金资助项目(批准号:302103). |
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摘 要: | 为了研究原核生物和真核生物(细胞质)色氨酰tRNA合成酶(TrpRS)对线粒体tRNA^Trp识别的种属特异性,构建了7个水稻线粒体tRNA^Trp三位点(G73,U72,A68)的单点或多点突变的突变体.这些突变基因,经体外转录后分别用枯草杆菌(B.subtilis)和人色氨酰tRNA合成酶(TrpRS)进行氨酰化反应,并测定它们的动力学常数.结果表明,与野生型水稻线粒体tRNA^Trp相比,7个突变体的转录产物被B.subtilis TrpRS氨酰化的活力分别降低了53.33%-99.79%,被人TrpRS氨酰化的活力却分别提高了4~330倍,其中以MPH7(水稻线粒体tRNA^Trp的三碱基(G73,U72和C68)全部突变为人tRNA^Trp的三碱基序列)的氨酰化活力改变最大.实验结果证明,与真核生物和原核生物细胞质tRNATrp的种族特异性类似,水稻线粒体tRNA^Trp的种属特异性元件也主要处于氨基酸接受茎的识别位碱基、第一和第五对碱基对,亦即识别位碱基G73,氨基酸接受茎上的两个碱基对G1/U72和U5/A68.本研究为线粒体tRNA^Trp起源于真细菌的推论提供了实验依据.
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关 键 词: | 种属特异性氨酰化 色氨酸tRNA 色氨酰tRNA合成酶 水稻 线粒体 |
收稿时间: | 2005-11-21 |
修稿时间: | 2005-11-212006-01-23 |
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