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禽流感病毒HSNl血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达毒
引用本文:邹淑梅,于在江,张烨,辛丽,陈永坤,陈禹保,陈清轩,舒跃龙.禽流感病毒HSNl血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达毒[J].实验动物科学,2011,28(3):1-4.
作者姓名:邹淑梅  于在江  张烨  辛丽  陈永坤  陈禹保  陈清轩  舒跃龙
基金项目:“十一五”国家科技支撵计划(No.2006BAD06A15)
摘    要:目的克隆、表达和鉴定禽流感病毒HSNI血凝素基因(hemaggludnin,HA)和神经氨酸酶基因(neuramidinase,NA) 序列,为制备抗体和基因T程疫苗打下基础。方法在成功克隆禽流感病毒H5NI全长HA、NA基因并测序的基础 上。将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA(49一l 587 bp)、pMET A/NA (121—1 200 bp),电转化真核酵母菌pMADl6,甲醇诱导表达,利用Ni“亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用 Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS—PAGE显示蛋白表 达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原 性。结论本研究成功克隆和表达了禽流感病毒H5NI HA、NA基因序列,为禽流感病毒H5N1诊断试剂和疫苗的 开发等进一步的研究提供了依据。

关 键 词:禽流感病毒H5NI  血凝素  神经氨酸酶  真核酵母表达  

Expression of the H5 N1 Influenza A Virus Hemagglutinin and Neuramidinase Genes in P.methanofica
ZOU Shu-Mei,YU Zai-Jiang,ZHANG Ye,XIN Li,CHEN Yong-Kun,CHEN Yu-Bao,CHEN Qing-Xuan,SHU Yue-Long.Expression of the H5 N1 Influenza A Virus Hemagglutinin and Neuramidinase Genes in P.methanofica[J].Shiyan Dongwu Kexue,2011,28(3):1-4.
Authors:ZOU Shu-Mei  YU Zai-Jiang  ZHANG Ye  XIN Li  CHEN Yong-Kun  CHEN Yu-Bao  CHEN Qing-Xuan  SHU Yue-Long
Abstract:
Keywords:H5N1 avian influenza virus  Hemagglutinin  Neuramidinase  Yeast expression  
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