噬菌体AB3裂解酶的抗菌谱及其抗菌机制

目的明确噬茵体AB3裂解酶LysAB3的抗茵谱及其抗菌机制。方法利用扩散法检测裂解酶LysAB3的抗茵谱;扩增裂解酶LysAB3基因序列前端的354 bp以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,Ni~(2+)-NTA亲和层析柱纯化重组蛋白,得到删除了两性多肽结构的裂解酶LysAB3-D,并测定其抗茵率。结果裂解酶LysAB3可以裂解全部40株鲍曼不动杆菌菌株;删除了两性多肽结构后,裂解酶LysAB3-D的抗菌率由95.8%下降至33.3%。结论裂解酶LysAB3的抗茵谱较宽;其杀菌机制可能是通过其两性多肽结构增加细菌外膜通透性,辅助酶解催化域进入其中降解肽聚糖。