| HIV-1病毒样颗粒真核表达系统的建立 |
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| 引用本文： | 许丹,郑瑾,孙丽娜,耿宜萍,李旭,王一理.HIV-1病毒样颗粒真核表达系统的建立[J].西北大学学报,2008,38(1):93-95. |
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| 作者姓名： | 许丹 郑瑾 孙丽娜 耿宜萍 李旭 王一理 |
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| 作者单位： | 许丹（西安交通大学,生物医学信息工程教育部重点实验室/西安交通大学疫苗研发中心,陕西,西安,710061）;郑瑾（西安交通大学,生物医学信息工程教育部重点实验室/西安交通大学疫苗研发中心,陕西,西安,710061）;孙丽娜（西安交通大学,生物医学信息工程教育部重点实验室/西安交通大学疫苗研发中心,陕西,西安,710061）;耿宜萍（西安交通大学,生物医学信息工程教育部重点实验室/西安交通大学疫苗研发中心,陕西,西安,710061）;李旭（西安交通大学,生物医学信息工程教育部重点实验室/西安交通大学疫苗研发中心,陕西,西安,710061）;王一理（西安交通大学,生物医学信息工程教育部重点实验室/西安交通大学疫苗研发中心,陕西,西安,710061） |
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| 摘 要： | 目的 利用哺乳动物细胞表达HIV-1病毒样颗粒,为HIV-1病毒的生物学研究和进一步设计HIV-1中和优势表位预防性疫苗奠定基础.方法 以293T细胞作为宿主细胞,利用磷酸钙沉淀法将带有HIV-1病毒被膜蛋白gp160基因的pcDNA3.1/BaL gp160真核表达载体和带有HIV-1核心蛋白(gag)的pVRC3900真核表达载体共转染至293T细胞中,收集培养上清,经蔗糖不连续梯度离心,收集病毒样颗粒,经磷钨酸负染,透射电镜观察结果 .结果 以磷酸钙沉淀DNA转移技术,EGFP真核表达质粒为靶基因,293T细胞为宿主细胞,最佳转染效率达30%以上;将peDt NA3.1/BaL gp160(env)和pVRC3900(gag)真核表达质粒共转染,宿主细胞成功表达目的 蛋白,转染细胞培养上清经蔗糖密度梯度离心,电镜观察可见自行装配的HIV病毒样颗粒.结论 在真核细胞中表达HIV-1病毒样颗粒.
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| 关 键 词： | HIV病毒样颗粒 真核表达 磷酸钙沉淀法 病毒 颗粒 真核表达系统 system eukaryotic expression particles 真核细胞 电镜观察 蔗糖密度梯度离心 上清经 细胞培养 转染效率 peDt 最佳 靶基因 真核表达质粒 EGFP 转移技术 沉淀 磷酸钙 |
| 文章编号： | 1000-274X(2008)01-0093-04 |
| 修稿时间： | 2007年7月2日 |
The construction of HIV-1 virus-like particles eukaryotic expression system |
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| XU Dan,ZHENG Jin,SUN Li-na,GEN Yi-ping,LI Xu,WANG Yi-li.The construction of HIV-1 virus-like particles eukaryotic expression system[J].Journal of Northwest University(Natural Science Edition),2008,38(1):93-95. |
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| Authors: | XU Dan ZHENG Jin SUN Li-na GEN Yi-ping LI Xu WANG Yi-li |
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