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| 水稻基因组DNA总甲基化水平测定方法 | |
| 引用本文： | 陈强,辛士刚,王俊伟,徐昕,李玥莹,李雪梅.水稻基因组DNA总甲基化水平测定方法[J].沈阳师范大学学报(自然科学版),2011,29(4):560-563. |
| 作者姓名： | 陈强 辛士刚 王俊伟 徐昕 李玥莹 李雪梅 |
| 作者单位： | 1. 沈阳师范大学实验中心,沈阳,110034 2. 沈阳师范大学工程技术学院,沈阳,110034 3. 沈阳师范大学化学与生命科学学院,沈阳,110034 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30870205) |
| 摘 要： | 对高效液相色谱法测定DNA总甲基化水平的关键因素进行研究,即基因组DNA的提取及纯化和高效液相色谱条件的选择。结果表明:CTAB法Ⅰ提取和纯化效果优于CTAB法Ⅱ;较优高效液相色谱条件为:采用Diamonsil C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)的色谱柱,以甲醇-10 mmol/L磷酸二氢钾(10-90,v/v)为流动相构成,流动相pH为4.7,流速为0.5 mL/min,柱温为30℃,紫外检测器波长为285 nm时,是分离胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的较优条件。以试验优化的DNA提取方法和HPLC色谱条件,基因组DNA水解液的胞嘧啶(C)和5-甲基胞嘧啶(5 mC)可得到较好的分离效果。 |
| 关 键 词： | DNA甲基化 高效液相色谱法 5-甲基胞嘧啶 胞嘧啶 流动相 |
On method for determination of total level of DNA methylation in rice |
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| CHEN Qiang,XIN Shi-gang,WANG Jun-wei,XU Xin,LI Yue-ying,LI Xue-mei.On method for determination of total level of DNA methylation in rice[J].Journal of Shenyang Normal University: Nat Sci Ed,2011,29(4):560-563. | |
| Authors: | CHEN Qiang XIN Shi-gang WANG Jun-wei XU Xin LI Yue-ying LI Xue-mei |
| Institution: | CHEN Qiang1,XIN Shi-gang1,WANG Jun-wei2,XU Xin1,LI Yue-ying3,LI Xue-mei3(1.Experimental Center,Shenyang Normal University,Shenyang 110034,China,2.College of Engineering,3.College of Chemistry and Life Science,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | DNA methylation high performance liquid chromatography 5-methylcytosine cytosine mobile phase |
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