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人源性14-3-3σ真核表达载体的构建及鉴定
引用本文:甘露,朱阅伟,周美娟,欧程山,丁振华.人源性14-3-3σ真核表达载体的构建及鉴定[J].科技信息,2010(22):24-25.
作者姓名:甘露  朱阅伟  周美娟  欧程山  丁振华
作者单位:[1]南方医科大学公共卫生与热带医学学院放射医学系 [2]南方医科大学2006级预防医学(食品安全)
基金项目:广东省自然科学基金博士启动项目资助(No.9451051501002535); 南方医科大学2008-2009学年学生课外科研学术活动立项项目资助(No.2008kw041);南方医科大学公共卫生与热带医学学院院长基金(2009年)
摘    要:目的:构建人源性14-3-3σ真核表达载体pCMV-Myc-SFN,并观察其在真核细胞中的表达。方法:通过反转录-聚合酶链反应从HeLa细胞(人宫颈癌细胞系)中获得编码14-3-3σ的cDNA,定向克隆至真核表达载体pCMV-Myc中,经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内14-3-3σ的表达。结果:构建了真核表达载体pCMV-Myc-SFN,将其转染HeLa细胞48h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内14-3-3σ的表达显著增高。结论:成功构建了真核表达载体pCMV-Myc-SFN,为研究14-3-3σ在上皮细胞源性肿瘤中的作用奠定了基础。

关 键 词:14-3-3σ  上皮性恶性肿瘤  真核表达载体
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