胎鼠脑组织生长锥的提取及鉴定 |
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引用本文: | 高媛,纪志盛,龚晓兵,林宏生,郭国庆.胎鼠脑组织生长锥的提取及鉴定[J].暨南大学学报,2013,0(4):378-384. |
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作者姓名: | 高媛 纪志盛 龚晓兵 林宏生 郭国庆 |
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作者单位: | 高媛 (暨南大学 附属第一医院 消化科,广东 广州510630; 暨南大学 医学院 解剖学教研室,广东 广州510630); 纪志盛 (暨南大学 附属第一医院 骨科,广东 广州510630; 暨南大学 医学院 解剖学教研室,广东 广州510630); 龚晓兵 (暨南大学 附属第一医院 消化科,广东 广州,510630); 林宏生 (暨南大学 附属第一医院 骨科,广东 广州,510630); 郭国庆 (暨南大学 医学院 解剖学教研室,广东 广州,510630); |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(项目编号:31170941) |
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摘 要: | 目的:建立脑组织生长锥提取的方法。方法:采用梯度蔗糖离心的方法提取生长锥,透射电镜和扫描电镜观察分离物的形态,免疫荧光和免疫印迹检测GAP-43的表达。结果:梯度浓度蔗糖离心把脑组织悬液分离为3层,上层密度小,浓度位于上清至0.75 mol/L蔗糖之间,中层密度较大,浓度位于0.75~1.00 mol/L蔗糖之间,下层密度最大,浓度位于1.00~2.66 mol/L蔗糖之间;透射电镜见上层分离物为大量着色浅的空泡状结构,颗粒大小较均匀,中、下层分离物为大量着色深的致密颗粒及不规则形态的细胞碎片,颗粒大小不均匀;扫描电镜见分离物颗粒均为白色、大小不一、形状不规则的颗粒,上层较中、下层颗粒体积大;免疫荧光及免疫印迹证实分离物中均有大量GAP-43表达,上层分离物几乎无GFAP表达,中、下层有少量GFAP表达。结论:梯度蔗糖离心的方法可以依据颗粒的大小分离脑组织,分离物最上层内的组分为生长锥。
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关 键 词: | 梯度蔗糖离心 大鼠 生长锥 电镜 免疫荧光 免疫印迹 |
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