| CRISPR/Cas9基因转录激活技术的建立及其应用 |
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| 引用本文： | 韩秋影,蔡宏,薛文,李涛,周涛. CRISPR/Cas9基因转录激活技术的建立及其应用[J]. 科学技术与工程, 2016, 16(20) |
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| 作者姓名： | 韩秋影 蔡宏 薛文 李涛 周涛 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物医学分析中心,军事医学科学院生物医学分析中心,军事医学科学院生物医学分析中心,军事医学科学院生物医学分析中心,军事医学科学院生物医学分析中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（面上项目，重点项目，重大项目） |
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| 摘 要： | 建立基于CRISPR/Cas9的基因转录激活技术,实现在HEK293细胞中激活cGAS基因的转录。首先利用慢病毒载体构建稳定表达Cas9的HEK293细胞;并采用Real-time PCR和western blot方法鉴定Cas9蛋白质表达效果。再选取不同靶序列,分别构建用于激活cGAS基因转录的sgRNA载体,将构建好的序列载体与CRISPR体系工具质粒共转染至稳定表达Cas9的HEK293细胞中。采用Real-time PCR方法检测细胞中内源cGAS的转录激活效果。成功建立了基于CRISPR/Cas9的基因转录激活技术,并在c GAS基因阴性表达的细胞中激活基因的转录。
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| 关 键 词： | CRISPR/Cas9 cGAS 转录激活 |
| 收稿时间： | 2016-03-09 |
| 修稿时间： | 2016-07-04 |
Establishment of CRISPR/Cas9-based gene transcription activation technology |
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| HAN Qiu-ying,CAI-Hong,XUE-Wen,LI-Tao and. Establishment of CRISPR/Cas9-based gene transcription activation technology[J]. Science Technology and Engineering, 2016, 16(20) |
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| Authors: | HAN Qiu-ying CAI-Hong XUE-Wen LI-Tao and |
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| Affiliation: | National Center of Biomedical Analysis,National Center of Biomedical Analysis,National Center of Biomedical Analysis, |
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| Abstract: | |
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