| 农杆菌介导法获得转pac1基因小麦并表现对大麦黄矮病毒的抗性 |
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| 作者姓名： | 燕飞 郑银英 张文蔚 肖红 李世访 成卓敏 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094 |
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| 基金项目： | 感谢李逢春博士提供RDV dsRNA,本工作为国家自然科学基金（编号：30370979）资助项目. |
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| 摘 要： | 自裂殖酵母中克隆得到pac1基因, 与GenBank中相关的核苷酸序列有99.3%的相似性. 编码蛋白质序列分析表明, 其具有RNaseⅢ结构域和双链RNA结合结构域. 体外活性测定表明, 以pET-5a系统在大肠杆菌中表达的pac1产物能够降解dsRNA. 将pac1导入双元载体pBI121, 以培养7~10 d的小麦幼胚为受体材料, 利用农杆菌株LBA4404对小麦品种陇鉴127进行转化, 获得了41株G418抗性植株, 经点杂交(dot blot)、RT-PCR和nptⅡELISA检测证实, 其中25株整合有外源基因并能正常表达. 对这25株转基因小麦进行大麦黄矮病毒的抗性鉴定表明, 有12株表现低度抗性, 表现为低接毒量时无症状, 接毒量提高时发病且严重; 有12株表现中度抗性, 表现为低接毒量时无症状, 接毒量提高时局部有不严重症状; 有1株表现高度抗性, 两种情况下均无症状. 抗性实验结果表明了pac1介导的抗性具有剂量效应的特点.
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| 关 键 词： | pac1 农杆菌介导法 小麦 转基因 抗病毒 大麦黄矮病毒 |
| 收稿时间： | 2006-05-24 |
| 修稿时间： | 2006-05-242006-07-20 |
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