| β-1,4-内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达研究 |
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| 作者姓名： | 廖贵芹 汪娜 马立新 |
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| 作者单位： | 湖北大学,生命科学学院,湖北,武汉,430062;武汉生物工程学院,湖北,武汉,430415 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 根据芽孢杆菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因序列设计引物,以pHBM102为模板,扩增得到β-1,4-内切葡聚糖酶GluD基因片段,克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pHBM905上,获得重组毕赤酵母表达载体pHBM905D,将此质粒分别转化毕赤酵母GS115,KM71和SMD1168菌株,筛选获得GS115(pHBM905D),KM71(pHBM905D),和SMD1168(pHBM905D),平板诱导培养表明,GS115(pHBM905D)所产生的水解圈最大,酶活力最高.摇瓶诱导培养,表达β-1,4-内切葡聚糖酶,此酶的最适反应温度为65℃,最适反应pH值6.4,在诱导8 d后酶活力达到最高为0.185 8 U/mL.
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| 关 键 词： | β-1 4-内切葡聚糖酶 芽孢杆菌 毕赤酵母 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2375（2007）03-0186-03 |
| 收稿时间： | 2006-06-20 |
| 修稿时间： | 2006-06-20 |
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