全骨髓贴壁法离体培养大鼠骨髓间充质干细胞及其生物学特征鉴定 |
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引用本文: | 王荣,李秀霞,周胜虎,于利明,李旭升.全骨髓贴壁法离体培养大鼠骨髓间充质干细胞及其生物学特征鉴定[J].甘肃科技,2017,33(4). |
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作者姓名: | 王荣 李秀霞 周胜虎 于利明 李旭升 |
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作者单位: | 1. 甘肃中医药大学临床医学院,甘肃兰州,730000;2. 兰州大学基础医学院循证医学中心,甘肃兰州,730000;3. 中国人民解放军兰州总医院关节外科,甘肃兰州,730050 |
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摘 要: | 验证全骨髓贴壁法离体培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs)的可行性,并对所获细胞进行生物学特征鉴定。采用全骨髓贴壁法离体培养大鼠BMSCs,通过倒置相差显微镜进行不同阶段的细胞形态学观察。通过流式细胞术进行BMSCs表型鉴定。通过成骨诱导分化实验检验其分化潜能。原代BMSCs接种48h后充分贴壁。72h后,呈集落式克隆,单体形态呈长梭形、三角形及多角形。细胞融合至80%~90%后呈"鱼群"或"旋涡"状排列。传至第四代的BMSCs失去其特征性形态,单体大而铺展,主要呈不规则形。传至第二代的BMSCs经流式细胞术检测后即呈现CD44、CD90阳性表达,而CD45阴性表达。第二代BMSCs成骨诱导3周后,碱性磷酸酶染色呈阳性,茜素红染色可见大量矿化结节形成。全骨髓贴壁法简便易行,可高效地体外分离、纯化及扩增大鼠BMSCs,所获细胞具备BMSCs的生物学特征。
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关 键 词: | 间充质干细胞 大鼠 鉴定 |
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