重组人Neuritin蛋白的简易纯化、鉴定及应用

Neuritin作为神经营养因子家族成员之一,在神经系统发育和神经损伤修复方面发挥重要作用。目的:获取重组人Neuritin蛋白是深入开展其功能和机制研究的重要物质基础。有效的纯化方法是获取重组蛋白的必备条件。方法:本研究基于前期利用AKTA纯化系统获得的蛋白质的基础上,对现有的重组人Neuritin蛋白的层析纯化条件进行优化。结果:获得了纯度为92%以上的重组人Neuritin蛋白。进一步的活性鉴定结果显示,该纯化蛋白能明显促进PC12细胞突起生长;且用此纯化蛋白成功制备的抗血清,不仅能有效结合重组人Neuritin蛋白,而且可识别细胞内源性Neuritin,证实免疫动物所用的重组人Neuritin蛋白具有良好的免疫原性。结论:以上研究表明本研究中所采用的纯化方法简易有效,是蛋白制备工作中必不可少的重要环节,对于深入Neuritin的功能及机制研究具有非常重要的意义。