| 水稻WRKY89中的亮氨酸拉链结构增强蛋白与W盒元件的相互作用 |
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| 引用本文： | 王海华,郝中娜,谢科,吴坤陆,郭泽建.水稻WRKY89中的亮氨酸拉链结构增强蛋白与W盒元件的相互作用[J].科学通报,2005,50(10):970-978. |
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| 作者姓名： | 王海华 郝中娜 谢科 吴坤陆 郭泽建 |
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| 作者单位： | 浙江大学生物技术研究所,杭州,310029;中国农业大学植物病理系,北京,100094;浙江大学生物技术研究所,杭州,310029;中国农业大学植物病理系,北京,100094 |
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| 基金项目： | 感谢彭友良教授提供水稻cDNA文库.本工作为国家重点基础研究发展计划(批准号:G2000016203)和国家自然科学基金(批准号:30370139,30471122)资助项目. |
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| 摘 要： | WRKY蛋白是一类参与植物生物和非生物胁迫反应、代谢、发育等过程的转录调节因子. 水稻WRKY89与其他的WRKY成员同源性较低, 推测由263个氨基酸组成, 其N端带1个可能的亮氨酸拉链结构. 采用pET-29b载体原核表达了OsWRKY89和其3个N端缺失的衍生物, 并采用Ni柱的方法对表达的蛋白进行了纯化. 凝胶阻滞结果表明, OsWRKY89能与含顺式元件W盒的DNA序列特异结 合, 而缺失N端亮氨酸拉链的OsWRKY89与该元件的结合能力显著下降. 酵母双杂交结果表明, 亮氨酸拉链样结构参与OsWRKY89蛋白的同源相互作用. 进一步缺失OsWRKY89至部分WRKY结构域导致表达的蛋白完全丧失与上述元件的结合活性, 表明WRKY结构域是DNA结合中不可缺少的. 这些结果说明亮氨酸拉链结构在蛋白质与蛋白质互作和DNA与蛋白质中起重要作用.
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| 关 键 词： | 转录因子 亮氨酸拉链 DNA结合 WRKY蛋白 水稻 |
| 收稿时间： | 2005-01-04 |
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