K.pneumoniae XJPD-Li甘油脱水酶基因的定点突变及其性能研究 |
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引用本文: | 吕波,徐小琳,张根林,李茜,李春. K.pneumoniae XJPD-Li甘油脱水酶基因的定点突变及其性能研究[J]. 石河子大学学报(自然科学版), 2009, 27(5): 609-612 |
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作者姓名: | 吕波 徐小琳 张根林 李茜 李春 |
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作者单位: | [1]石河子大学食品学院/新疆兵团化工绿色过程重点实验室,石河子832000 [2]北京理工大学生命科学与技术学院,北京100081 |
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基金项目: | 霍英东教育基金,国家自然科学基金 |
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摘 要: | 针对菌株K.pneumoniae XJPD—Li高效转化生产1,3-丙二醇的特性,将其甘油脱水酶与已知报道的甘油脱水酶(U60992)的序列比对分析,根据差异位点设计了Nβ471的定点突变,利用反向PCR定点突变技术构建了甘油脱水酶(dhaBCE)的突变体质粒M1821,并在E.coli BL21(DE3)中高效表达。SDS—PAGE结果显示,诱导表达后在相对分子质量66、24、16KD出现三条特征条带,与预期结果一致。突变体M1821甘油脱水酶的比酶活为38.7U/mg,催化反应最适pH为8.0,最适温度为40℃,与未突变重组甘油脱水酶比较,最适温度降低了约5℃。
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关 键 词: | K.pneumoniae XJPD—Li 甘油脱水酶 定点突变 |
Site-directed Mutagenesis of Glycerol Dehydratase from K.pneumoniae XJPD-Li |
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Abstract: | |
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Keywords: | K.pneumoniae XJPD-Li |
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