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人源Krt5促进斑马鱼成纤维细胞丝状伪足形成和伤口愈合
引用本文:陈凯星,尉菲菲,吴文惠,严继舟.人源Krt5促进斑马鱼成纤维细胞丝状伪足形成和伤口愈合[J].暨南大学学报,2023(3):227-237.
作者姓名:陈凯星  尉菲菲  吴文惠  严继舟
作者单位:1. 上海海洋大学水产与生命学院;2. 上海海洋大学食品学院;3. 上海海洋大学海洋生物系统和神经科学研究所
基金项目:国家自然科学基金项目(82173731);;上海市自然科学基金项目(21ZR1427300);
摘    要:目的:探究斑马鱼角蛋白Krt5和M1/M2型巨噬细胞极化因子调节斑马鱼下颌和心脏芽基可塑性再生过程的机制。方法:在斑马鱼胚胎成纤维细胞PAC2中过表达人源Krt5,添加4个代表性的巨噬细胞极化因子蛋白。在检测蛋白表达情况后,免疫荧光法观察Krt5和F-actin在PAC2细胞的分布变化;细胞划痕实验检测PAC2细胞迁移能力;转录组测序和免疫沉淀-质谱(IP-MS)分析Krt5调控网络。结果:Krt5围绕着细胞核,在胞浆成束成网分布并扩展到细胞质膜;过表达Krt5增加鬼笔环肽标记的F-actin代表的细胞丝状伪足形成,并加快细胞迁移愈合;转录组分析显示,Krt5明显增加Rac2/Rhov、NF-κB、Mylkb、Ifnphi1、IL-13和IL-11的转录,降低多个胶原蛋白、肌动蛋白和TGF-β家族基因转录,同时IL-1β、IL-4、IL-6和IL-10诱导处理总体上与Krt5作用一致;IP-MS证实Krt5与α-辅肌动蛋白(Actn1)和非肌肉肌球蛋白重链(Myh9b, Myh10)紧密结合。结论:Krt5可能通过与肌动蛋白相互作用激活Rac/Rho机制从而促进细胞生成丝状伪足,重塑细...

关 键 词:角蛋白5(Krt5)  mRNA  巨噬细胞极化因子  丝状伪足  Myh9b  Myh10  斑马鱼  成纤维细胞
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