pEZsiRNA6.1/hHif-1α稳定转染食管鳞癌EC-9706细胞系的建立 |
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作者姓名: | 汲 翔 曹 博 金 硕 李 军 李 懿 范丹丹 郭 欢 汲振余 范天黎 |
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作者单位: | 1.郑州大学 基础医学院, 郑州; 2.郑州大学 医药科学研究院, 郑州; 3.甘肃省肿瘤医院 基因多态性研究中心, 兰州 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目,郑州大学大学生创新创业训练计划项目 |
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摘 要: | 利用基因工程技术将合成的HIF-1α shRNA与pEZsiRNA6.1空载体连接,构建pEZsiRNA6.1/hHif-1α载体,PCR和测序结果表明所构建的pEZsiRNA6.1/hHif-1α重组载体正确.进一步将所构建的载体转染人食管鳞癌EC-9706细胞系,利用G418筛选HIF-1α稳定干扰的细胞系,荧光显微镜检测结果表明:稳定转染pEZsiRNA6.1/hHif-1α的EC-9706细胞均有绿色荧光蛋白示踪.经CoCl2诱导模拟缺氧4 h,Western Blot结果显示pEZsiRNA6.1/hHif-1α能有效抑制EC-9706缺氧食管癌细胞HIF-1α的诱导表达.
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关 键 词: | HIF-1α 基因沉默 光动力学疗法 食管鳞癌 |
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