人载脂蛋白基因apoAⅠ在毕赤氏酵母中的表达 |
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作者姓名: | 张淼 赵志安 杨婷婷 刘林 宋大新 |
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作者单位: | 复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433 |
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基金项目: | 复旦大学Med X基金重点资助项目,上海市科学技术委员会资助项目 (0 2 4 3192 0 4 ) |
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摘 要: | 将化学法合成的apoAⅠ基因插入分泌型载体 pPIC9K .将重组的 pPIC9K apoAⅠ用BglⅡ酶切后 ,转化PichiapastorisGS115菌株 ,筛选获得G4 18高抗性转化子 .转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导 ,上清液用SDS PAGE检测 ,有明显的rApoAⅠ表达 .经Phenyl sepharose 6 (FastFlow)疏水层析柱和SephadexG 5 0 (coarse)分子筛层析 ,得到rApoAⅠ蛋白纯品 .经Westernblotting ,N末端氨基酸顺序测定证明 ,毕赤氏酵母表达的rApoAⅠ与人血浆提取的ApoAⅠ基本一致 .
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关 键 词: | 人载脂蛋白ApoAⅠ 分泌型载体 毕赤氏酵母 蛋白质印迹 N末端氨基酸顺序测定 |
文章编号: | 0427-7104(2004)02-0181-04 |
修稿时间: | 2003-05-18 |
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