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人载脂蛋白基因apoAⅠ在毕赤氏酵母中的表达
作者姓名:张淼  赵志安  杨婷婷  刘林  宋大新
作者单位:复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433
基金项目:复旦大学Med X基金重点资助项目,上海市科学技术委员会资助项目 (0 2 4 3192 0 4 )
摘    要:将化学法合成的apoAⅠ基因插入分泌型载体 pPIC9K .将重组的 pPIC9K apoAⅠ用BglⅡ酶切后 ,转化PichiapastorisGS115菌株 ,筛选获得G4 18高抗性转化子 .转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导 ,上清液用SDS PAGE检测 ,有明显的rApoAⅠ表达 .经Phenyl sepharose 6 (FastFlow)疏水层析柱和SephadexG 5 0 (coarse)分子筛层析 ,得到rApoAⅠ蛋白纯品 .经Westernblotting ,N末端氨基酸顺序测定证明 ,毕赤氏酵母表达的rApoAⅠ与人血浆提取的ApoAⅠ基本一致 .

关 键 词:人载脂蛋白ApoAⅠ  分泌型载体  毕赤氏酵母  蛋白质印迹  N末端氨基酸顺序测定
文章编号:0427-7104(2004)02-0181-04
修稿时间:2003-05-18
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