Mutator转座子介导的玉米插入突变体库的构建及遗传评价 |
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引用本文: | 刘文婷,高友军,腾峰,史卿,郑用琏.Mutator转座子介导的玉米插入突变体库的构建及遗传评价[J].科学通报,2006,51(17):2030-2036. |
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作者姓名: | 刘文婷 高友军 腾峰 史卿 郑用琏 |
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作者单位: | 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,武汉,430070 |
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基金项目: | 本研究为农业部引进国际先进农业技术项目(批准号:2003-Q03-1-20). |
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摘 要: | 以Q105, WW51, 115F, V26-2, 919J为Mutator转座子供体材料, 与本地优良玉米自交系受体材料Hz85, W328以及S-Mo17Rf3Rf3杂交, 获得26718单株的插入诱变F1群体(M1). 田间鉴定M1单株的生物学特征及农艺学性状的表型突变, 室内考察突变单株自交果穗M2籽粒性状的突变类型, 并以斑点籽粒出现的频率评价Mu因子的转座频率. 结果表明, 在所构建的Mu介导的玉米插入突变体库中, 以W328为母本(BzBz)的M1群体平均田间表型突变频率为0.07; 以W328 × Mu的M2果穗斑点籽粒的出现频率评价的Mu转座频率为0.121802; 在22500个S-Mo17Rf3Rf3 × Mu单株中, 发现了5个S型玉米细胞质雄性不育突变单株, 突变频率为2.2×10-4. 利用优化的MuTAIL-PCR技术分析了99条转座子插入位点的侧翼序列, 归并整理后获得59条(每条约400核苷酸序列)非重复靶位点序列. 对59条序列非重复的Mu因子插入产生的9 bp靶位点正向重复序列进行同源性比较分析, 结果表明, Mu的插入有序列热点. 经生物信息学分析后注释了27条与玉米、水稻等植物核苷酸数据库中匹配值较高的功能序列. 利用比较基因组学方法将36条单一基因序列定位在玉米遗传图谱上, 有多条Mu插入靶位点序列定位在单个标记位点上. 分析发现, 8条Mu插入靶位点序列的预测功能与其相应的定位标记的功能具有一致性. Mu插入突变体库的构建与遗传评价为利用Mu转座子进一步发掘玉米基因、深入开展玉米功能基因组学研究搭建起重要的技术与材料平台.
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关 键 词: | 玉米 Mutator转座子 突变体库 MuTAIL-PCR |
收稿时间: | 2006-05-24 |
修稿时间: | 2006-05-242006-07-07 |
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