人神经生长因子β亚基的基因在P.pastoris和E.coli中的表达 |
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引用本文: | 范乔,刘宏迪,孙彤,赫荣乔.人神经生长因子β亚基的基因在P.pastoris和E.coli中的表达[J].科学通报,1999,44(6):637-642. |
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作者姓名: | 范乔 刘宏迪 孙彤 赫荣乔 |
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作者单位: | 1. 中国科学院微生物研究所,北京100080;中国科学院生物物理研究所,北京100101 2. 中国科学院微生物研究所,北京100080 3. 中国科学院生物物理研究所,北京100101 |
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摘 要: | 将hNGFB基因插入甲醇营养性酵母P .pastoris分泌表达载体pHIL S1和E .coli表达载体pET 15b中 ,相应转化P .pastorisGS115 (Mut+,His- )和E .coliBL2 1(DE3 ) .在不含组氨酸平板上生长的酵母转化子通过PCR进一步筛选阳性克隆 ,P .pastoris重组菌株的蛋白电泳表明发酵液中有特异表达带 ,扫描分析占细胞外泌总蛋白的 14 .4% ,Westernblotting证实该分泌蛋白具有hNGF的免疫活性 .E .coli重组菌株在IPTG的诱导下表达融合蛋白 .电泳扫描分析表达的融合蛋白占细胞总蛋白量的 10 .3 % ,Westernblotting检测表明具有免疫活性 .
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关 键 词: | 人神经生长因子 分泌表达 融合蛋白 |
收稿时间: | 1998-07-07 |
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