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重组人TRAIL胞外片段的原核表达系统选择及蛋白复性研究
引用本文:吴冬梅,金丽娜,刘顺谊,司马健,邰一琳,吴一凡,乔波,殷志敏. 重组人TRAIL胞外片段的原核表达系统选择及蛋白复性研究[J]. 南京师大学报(自然科学版), 2006, 29(2): 85-90
作者姓名:吴冬梅  金丽娜  刘顺谊  司马健  邰一琳  吴一凡  乔波  殷志敏
作者单位:南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097;南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097;南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097;南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097;南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097;南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097;南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097;南京师范大学生命科学学院生物制品研究所,江苏,南京,210097
基金项目:教育部高校骨干教师资助计划;江苏省教育厅重点项目
摘    要:采用PCR技术从人肝脏cDNA文库扩增出编码114~281位氨基酸的TRAIL基因片段,将之克隆至原核表达载体pET-30a、pQE-30和pJLA503中,上述重组载体经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE鉴定显示pET-30a系统表达效率最高,目的蛋白占菌体总蛋白含量的40%左右;采用透析法或梯度稀释法对TRAIL胞外区片段包涵体进行复性,非还原SDS-PAGE的结果显示梯度稀释法明显好于透析法;纯化后的TRAIL胞外区片段蛋白具有明显的生物学活性,效果与标准品相似;通过添加不同的折叠促进剂对复性效率影响的研究,确立了TRAIL胞外区片段适宜的复性方法,复性效率达75%~80%.

关 键 词:TRAIL  蛋白表达  复性  细胞凋亡
文章编号:1001-4616(2006)02-0085-06
收稿时间:2005-02-20
修稿时间:2005-02-20

Prokaryltic Expression and Renaturation of Recmbinant Human Extracellular TRAIL Fragment
Wu Dongmei,Jin Lina,Liu Shunyi,Sima Jian,Tai Yilin,Wu Yifan,Qiao Bo,Yin Zhimin. Prokaryltic Expression and Renaturation of Recmbinant Human Extracellular TRAIL Fragment[J]. Journal of Nanjing Normal University(Natural Science Edition), 2006, 29(2): 85-90
Authors:Wu Dongmei  Jin Lina  Liu Shunyi  Sima Jian  Tai Yilin  Wu Yifan  Qiao Bo  Yin Zhimin
Affiliation:Institute of Biochemistry and Biological Product, School of Life Science, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China
Abstract:
Keywords:TRAIL
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