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VMP1基因的克隆及其抗体的制备与鉴定
引用本文:谢琳娜,李勤喜.VMP1基因的克隆及其抗体的制备与鉴定[J].厦门大学学报(自然科学版),2006,45(Z1):134-137.
作者姓名:谢琳娜  李勤喜
作者单位:厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005
摘    要:为了得到效价高、特异性强、能用于检测内源性 VMP1 蛋白的抗体,采用RT-PCR 法,从L929细胞株中克隆鼠VMP1基因,重组入pCMV5载体,用 PCR 扩增与其氨基酸 132-239 区域对应的DNA片断,将该片段连接到原核表达载体 pGST parallel 中,在大肠杆菌 BL21 菌株中大量表达,经谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化后,得到高纯度的 VMP1抗原.免疫新西兰兔,获得抗 VMP1 蛋白的兔抗血清,将血清纯化后即得到抗 VMP1 的多克隆抗体.用 Western blot 分析手段检测了该抗体的特异性及效价.在用该抗体检测外源性和内源性 VMP1 蛋白的试验中,证实该抗体效价高,特异性强,效果很理想.此方法可用于获得大量廉价的抗 VMP1 蛋白的高滴度和高特异性的抗体,为进一步研究 VMP1 在细胞内,尤其是在信号转导通路中的功能和作用奠定了基础.

关 键 词:表达  抗体制备  纯化
文章编号:0438-0479(2006)S-0134-04
修稿时间:2005年12月23

Preparation and Identification of the Rabbit Polyclonal Antibodies from VMP1
XIE Lin-na,LI Qin-xi.Preparation and Identification of the Rabbit Polyclonal Antibodies from VMP1[J].Journal of Xiamen University(Natural Science),2006,45(Z1):134-137.
Authors:XIE Lin-na  LI Qin-xi
Abstract:
Keywords:VMP1
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