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解淀粉芽孢杆菌ptsGHI基因的敲除及缺陷株生长特性
引用本文:杨慧林,王坤,廖瑜玲,王斌,林影,潘力. 解淀粉芽孢杆菌ptsGHI基因的敲除及缺陷株生长特性[J]. 华南理工大学学报(自然科学版), 2012, 40(8)
作者姓名:杨慧林  王坤  廖瑜玲  王斌  林影  潘力
作者单位:华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006
基金项目:国家“863”计划项目
摘    要:在解淀粉芽孢杆菌磷酸转移酶系统中,葡萄糖主要是由ptsGHI操纵子编码的酶EI、HPr、EIIGlc转运入细胞.文中运用PCR技术,扩增出ptsG和ptsHI基因上下游的DNA片段,共约1kbp,用融合PCR连接上下游片段后,再连接到温敏型质粒pKS2上,然后电转化到解淀粉芽孢杆菌XH7中,最终构建了ptsG和ptsHI基因缺陷株.实验结果显示:在LB培养基中,tsG及ptsHI基因缺陷株的生长状况与野生型菌株无明显差异;在含葡萄糖的LB培养基中,ptsG基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株提高了28%,且平稳期比野生型菌株要长,而ptsHI基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株降低了约32%,与其在LB中的生长状况基本一致;ptsG和ptsHI缺陷株及野生型菌株经鸟苷发酵实验后,ptsG基因缺陷株的鸟苷产量比野生型菌株提高了约24%,ptsHI基因缺陷株的鸟苷产量则比野生型菌株降低了约82%.以上结果表明:解淀粉芽孢杆菌ptsG基因缺陷株具有良好的生长能力和产物合成能力.

关 键 词:解淀粉芽孢杆菌  磷酸转运系统  基因敲除  代谢工程

Knockout of ptsGHI Gene of Bacillus amyloliquefaciens and Growth Characteristics of Corresponding Deficient Strain
Yang Hui-lin , Wang Kun , Liao Yu-ling , Wang Bin , Lin Ying , Pan Li. Knockout of ptsGHI Gene of Bacillus amyloliquefaciens and Growth Characteristics of Corresponding Deficient Strain[J]. Journal of South China University of Technology(Natural Science Edition), 2012, 40(8)
Authors:Yang Hui-lin    Wang Kun    Liao Yu-ling    Wang Bin    Lin Ying    Pan Li
Abstract:
Keywords:
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