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黑老虎ISSR-PCR反应体系的建立与优化
引用本文:唐健民,漆小雪,蒋运生,熊忠臣,邹蓉.黑老虎ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].广西科学,2020,27(4):406-412.
作者姓名:唐健民  漆小雪  蒋运生  熊忠臣  邹蓉
作者单位:广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所, 广西植物功能物质研究与利用重点实验室, 广西桂林 541006
基金项目:桂林市科技计划(20160223-1),广西科技攻关项目(桂科AB18221091),中央引导地方科技发展专项(桂科ZY1949013),广西科技基础和人才专项(桂科AD17129022)和广西植物功能物质研究与利用重点实验室项目(ZRJJ2018-10)资助。
摘    要:为建立和优化特色药食两用植物黑老虎(Kadsura coccinea)的ISSR-PCR反应体系和扩增程序,通过正交和单因素试验研究Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数等因素对黑老虎ISSR-PCR反应体系扩增效果的影响。结果表明,在20 μL的反应体系中,最佳扩增条件为Mg2+浓度2.5 mmol/L、dNTPs浓度0.1 mmol/L、引物浓度0.6 μmol/L、Taq DNA聚合酶用量1.50 U、模板DNA用量45 ng,退火温度50.4℃,循环40次。这一优化体系的建立可为深入开展黑老虎种质资源遗传多样性研究奠定基础。

关 键 词:黑老虎  ISSR-PCR  正交设计  单因素试验  反应体系优化

Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Kadsura coccinea
TANG Jianmin,QI Xiaoxue,JIANG Yunsheng,XIONG Zhongchen,ZOU Rong.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Kadsura coccinea[J].Guangxi Sciences,2020,27(4):406-412.
Authors:TANG Jianmin  QI Xiaoxue  JIANG Yunsheng  XIONG Zhongchen  ZOU Rong
Institution:Guangxi Key Laboratory of Functional Phytochemicals Research and Utilization, Guangxi Institute of Botany, Guangxi Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences, Guilin, Guangxi, 541006, China
Abstract:
Keywords:Kadsura coccinea  ISSR-PCR  orthogonal design  single factor test  optimization of reaction system
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