| Paenibacillus sp.K1 α-半乳糖苷酶酶学性质 |
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| 引用本文： | 辛永平,孔文涛,陆文伟,孔健.Paenibacillus sp.K1 α-半乳糖苷酶酶学性质[J].山东大学学报(理学版),2015(1):50-55. |
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| 作者姓名： | 辛永平 孔文涛 陆文伟 孔健 |
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| 作者单位： | 1. 山东大学微生物技术国家重点实验室,山东 济南,250100
2. 伊利诺斯大学香槟分校生物工程系，美国 乌尔班纳 伊利诺伊61801 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划课题资助项目(2012BAD39B01-6)；国家863课题资助项目 |
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| 摘 要： | 利用CODEHOP PCR和Anchor-ligated PCR方法从类芽孢杆菌Paenibacillus sp.K1中克隆得到一个α-半乳糖苷酶基因aga P1,大小为2 190 bp,同源性分析显示,该基因与其他α-半乳糖苷酶基因的序列相似低,是一个新的α-半乳糖苷酶基因。将aga P1在大肠杆菌Origami B(DE3)中表达并纯化获得Aga P1,酶学性质分析显示:以p NPG为底物时,Aga P1最适反应温度为40℃,最适p H 6.5~10,Km值为0.75 mmol/L,最大反应速率Vmax为1.96μmol·min-1·mg-1。同时Fe2+、Mg2+、Ca2+、K+和甘油能使α-半乳糖苷酶酶活提高1~3倍,而Cu2+、Zn2+、Fe3+和还原型谷胱甘肽则抑制该酶的活性。SDS-PAGE检测Aga P1蛋白大小约为80 ku,与理论预测值基本一致;Native-PAGE分析表明正常条件下Aga P1蛋白以二聚体或六聚体形式存在。以上结果显示,Paenibacillus sp.K1产生的α-半乳糖苷酶为一个新的低温α-半乳糖苷酶。
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| 关 键 词： | 类芽孢杆菌 α-半乳糖苷酶 酶学性质 |
Characterization of the alpha-galactosidase of Paenibacillus sp.K1 |
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| XIN Yong-ping,KONG Wen-tao,LU Wen-wei,KONG Jian.Characterization of the alpha-galactosidase of Paenibacillus sp.K1[J].Journal of Shandong University,2015(1):50-55. |
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| Authors: | XIN Yong-ping KONG Wen-tao LU Wen-wei KONG Jian |
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| Institution: | XIN Yong-ping;KONG Wen-tao;LU Wen-wei;KONG Jian;State Key Laboratory of Microbial Technology,Shandong University;Department of Bioengineering,University of Illinois at Urbana-Champaign; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Paenibacillus alpha-galactosidase enzymic properties |
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