| 菠菜43 kD叶绿素a结合蛋白编码基因克隆及原核表达条件优化 |
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| 引用本文： | 刘骥,王豪,肖清洁,谢思思,杜林方.菠菜43 kD叶绿素a结合蛋白编码基因克隆及原核表达条件优化[J].四川大学学报(自然科学版),2015,52(1):199-204. |
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| 作者姓名： | 刘骥 王豪 肖清洁 谢思思 杜林方 |
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| 作者单位： | 1. 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室，成都 610064; 西南民族大学生命科学与技术学院，成都 610041
2. 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064 |
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| 基金项目： | 国家973计划项目(2009CB118502); 国家自然科学基金资助项目(30870181); 教育部博士点基金(NO.20070610168)资助; 西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金资助(11NZYQN31) |
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| 摘 要： | 将菠菜43 kD叶绿素结合蛋白编码基因亚克隆至原核表达载体pET-28a上,构建重组表达质粒pET-28a-psbC转化感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导实现了外源基因的可溶性表达.探讨了含组氨酸标签融合蛋白的最佳表达条件(包括表达单克隆、时间、温度对表达的影响).利用Ni2+-Sepharose 4 Fast Flow亲合层析纯化出His-apo CP43蛋白.体外重组实验证实 His-apo CP43能特异结合叶绿素a,经过温和电泳分离纯化所得体外重组色素蛋白复合物具有与提取自类囊体膜的天然CP43相似(但不完全相同)的荧光特性.
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| 关 键 词： | 43kD叶绿素a结合蛋白 原核表达 条件优化 色素重组 荧光性质 |
| 收稿时间： | 2014/4/15 0:00:00 |
Cloning and prokaryotic expression of spinach 4 3 kDa chlorophyll a binding protein gene in Escherichia coli |
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| LIU Ji,WANG Hao,XIAO Qing-Jie,XIE Si-Si and DU Lin-Fang.Cloning and prokaryotic expression of spinach 4 3 kDa chlorophyll a binding protein gene in Escherichia coli[J].Journal of Sichuan University (Natural Science Edition),2015,52(1):199-204. |
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| Authors: | LIU Ji WANG Hao XIAO Qing-Jie XIE Si-Si and DU Lin-Fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | His apo CP43 fusion protein prokaryotic expression purification reconstitution experiment fluorescence |
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