神经营养素-3的克隆与真核表达 |
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引用本文: | 张伶俐,胡火珍,李小玉,郑雪莲.神经营养素-3的克隆与真核表达[J].四川大学学报(自然科学版),2002(Z1). |
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作者姓名: | 张伶俐 胡火珍 李小玉 郑雪莲 |
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作者单位: | 四川大学生命科学院细胞生物学教研室 四川大学生命科学院细胞生物学教研室 成都 |
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摘 要: | 目的 构建人神经营养素 - 3(NT 3)的真核表达质粒 .方法 由于NT 3基因中无内含子 ,因此直接运用PCR技术从人基因组DNA中分离出人NT 3完整基因 ,与 pcDNA3.1(- )载体重组并测序 ,获得pcDNA NT3.用脂质体介导法将重组质粒转染人胚肾 2 93A细胞株 ,经G4 18筛选后 ,用RT PCR和免疫荧光法在转录和翻译两个水平上检测表达产物 .结果 测序证实所获得的是正确的重组质粒 .它的转录和翻译产物均可在细胞中检测到 .结论 成功地进行了NT 3的克隆与真核表达 ,NT 3基因修饰后的胚胎细胞有可能对神经轴突的生长起指导作用 .该实验结果为深入研究NT 3的生物学作用创造了条件 ,为基因修饰细胞移植治疗神经疾病的实验研究奠定了基础 .
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关 键 词: | 神经营养素-3 真核表达 克隆 |
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