节杆菌PJ3基因组中发现2,3-二羟基联苯双加氧酶基因 |
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引用本文: | 杨美英,麻鹏达,李文明,刘晶莹,李亮,朱筱娟,王兴智.节杆菌PJ3基因组中发现2,3-二羟基联苯双加氧酶基因[J].科学通报,2007,52(7):785-790. |
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作者姓名: | 杨美英 麻鹏达 李文明 刘晶莹 李亮 朱筱娟 王兴智 |
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作者单位: | 1. 东北师范大学遗传与细胞研究所,长春,130024;吉林农业大学生命科学学院,长春,130118 2. 东北师范大学遗传与细胞研究所,长春,130024 |
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基金项目: | 中国-瑞典国际合作项目(批准号:AM15812)、长江学者和高校创新团队(批准号:IRT0519)、高等学校学科创新引智计划(批准号:B07017)、国家植物转基因中试与产业化基地(吉林)(批准号:JY03-B-17)和长春市科技局国际合作项目资助 |
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摘 要: | 从污水中分离出一株以咔唑为惟一碳源和氮源生长的菌株PJ3, 用 16S rDNA 鉴定为节杆菌(Arthrobacter sp), 构建了PJ3菌株基因组文库并获得一株阳性克隆JM109 (pUCW402). 通过GenSCAN软件和BLAST分析发现, 在插入pUCW402的外源片段(3360 bp)中存在一个由933 bp片段编码的2,3-二羟基联苯双加氧酶基因. 进化分析表明, 从PJ3来源的2,3-二羟基联苯双加氧酶在进化树上形成一个独立的分支. Southern杂交进一步证实, 编码该酶的基因定位于节杆菌PJ3的基因组DNA上. 为了鉴定该基因的生物学功能, 构建了BL21 (pETW-8)重组菌株. 与菌株JM109 (pUCW402)和PJ3相比, 2,3-二羟基联苯双加氧酶的表达水平在BL21 (pETW-8)中最高. 酶活分析表明, 2,3-二羟基联苯双加氧酶不具有绝对专一性, 对2,3-二羟基联苯的催化能力高于邻苯二酚. 因此推测PJ3菌株对芳香族化合物降解过程中, 2,3-二羟基联苯双加氧酶主要负责催化双环化合物的降解.
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关 键 词: | 2 3-二羟基联苯双加氧酶基因 节杆菌(Arthrobacter sp) 进化树 基因定位 酶活力 |
收稿时间: | 2007-01-31 |
修稿时间: | 2007-01-312007-03-19 |
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