| 腺病毒载体介导的GFP在鸡胚成纤维细胞中的表达及RNA干涉 |
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| 引用本文： | 傅安静,汤承,李定霏,谢青,岳华. 腺病毒载体介导的GFP在鸡胚成纤维细胞中的表达及RNA干涉[J]. 西南民族学院学报(自然科学版), 2008, 34(2): 276-280 |
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| 作者姓名： | 傅安静 汤承 李定霏 谢青 岳华 |
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| 作者单位： | [1]西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041 [2]成都农业科技职业学院,四川成都611130 [3]成都市农林科学院水产研究所,四川成都610072 [4]四川省兽药监察所,四川成都610041 |
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| 基金项目： | "十一五"国家科技支撑汁划重大项目资助(2006BAD06A08);四川省应用基础资助项目(No.05JY029-007-5). |
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| 摘 要： | 鸡胚成纤维细胞（CEF）是多种动物及人类病毒的易感细胞；也是研究鸡的基因组功能的理想材料．本试验的目的是研究非复制型腺病毒载体对CEF的转染效率及安全性；并建立在CEF细胞中进行RNAi的技术平台．采用GFP重组非复制型腺病毒载体（Ade-GFP）转染CEF细胞：结果证明0．1．2000 MOI Adv-GFP均可转染CEF细胞并表达GFP；转染后16h开始出现GFP阳性细胞：胞核与胞浆可见明亮的荧光：荧光细胞数量及荧光强度在24～36h达到高峰：以后逐渐衰减；约180h全部消失；转染效率最高为22.3％；形态学观察及流式细胞仪测定结果显示：Adv-GFP转染的CEF细胞未见细胞病变；多数转染组细胞活力不受影响：说明用Adv-GFP携带外源转染CEF细胞是安全可行的；用脂质体转染试剂转染化学合成的GFP-siRNA；成功地干涉了腺病毒载体介导的GFP基因在鸡胚成纤维细胞的表达：干涉效率为85％：证明了鸡胚成纤维细胞中存在RNAi机制：为进一步利用非复制型腺病毒载体递送siRNA在CEF细胞内进行RNAi的研究奠定了基础．
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| 关 键 词： | RNA干涉 腺病毒载体 鸡胚成纤维细胞 绿荧光蛋白 |
| 文章编号： | 1003-2843(2008)02-0276-05 |
| 修稿时间： | 2007-12-20 |
The expression and RNAi of GFP gene adenovirus vector mediated in chick embryo fibroblast cells |
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| FU An-jing,TANG Cheng,LI Ding-fei,XIE Qing,YUE Hua. The expression and RNAi of GFP gene adenovirus vector mediated in chick embryo fibroblast cells[J]. Journal of Southwest Nationalities College(Natural Science Edition), 2008, 34(2): 276-280 |
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| Authors: | FU An-jing TANG Cheng LI Ding-fei XIE Qing YUE Hua |
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