| 利用经修饰的survivin短肽体外诱导对胃癌细胞系具有限制性杀伤作用的特异性细胞毒性T细胞 |
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| 引用本文： | 孙婷,魏立梅,丁刚.利用经修饰的survivin短肽体外诱导对胃癌细胞系具有限制性杀伤作用的特异性细胞毒性T细胞[J].科学技术与工程,2012,12(35):9461-9465. |
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| 作者姓名： | 孙婷 魏立梅 丁刚 |
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| 作者单位： | 山东省潍坊市宜都中心医院口腔正畸科,青州,261000 |
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| 基金项目： | 异体牙齿干细胞移植与机体B淋巴细胞相互影响的研究 |
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| 摘 要： | 采用一种简单有效的方法体外诱导经修饰的survivin短肽特异性细胞毒性T细胞,并观察其对胃癌细胞的杀伤作用。选取对HLA-A2分子亲和力更高的survivin短肽(96—104,LLLGEFLKL,HLA-A2限制性)以更有效地诱导特异性T细胞。选取正常志愿者外周血单核细胞,筛选其中HLA-A2+者,利用HLA-A2/survivin短肽有效诱导特异性细胞毒性T细胞。Pentamer实验检测特异性细胞毒性T细胞比率。Elispot实验检测细胞毒性T细胞IFN-γ分泌能力。选取胃癌细胞系MKN28、SGC7901及KATO Ⅲ,检测其HLA-A2和survivin表达情况。检测特异性细胞毒性T细胞对三种细胞系的杀伤效果。Pentamer实验结果显示,HLA-A2/survivin短肽刺激之前短肽/HLA Pentamer和CD8双阳性细胞仅为0.06%,接受刺激后双阳性细胞增加到27.5%。Elispot实验结果显示HLA-A2/survivin短肽刺激后IFN-γ分泌细胞比率明显强于阴性对照组。PCR结果显示,KATO Ⅲ为HLA-A2+,MKN28和SGC7901为HLA-A2-。Western Blotting结果显示KATO III和SGC7901为survivin阳性,MKN28为survivin阴性。特异性细胞毒性T细胞杀伤结果显示,细胞能有效杀伤KATO III细胞,但对其他两种细胞杀伤效果不明显。p<0.01。经修饰的survivin短肽能够有效诱导特异性细胞毒性T细胞,并对胃癌细胞系有HLA-A2/survivin限制性杀伤。
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| 关 键 词： | survivin 经修饰肽段 HLA-A2 外周血单核细胞 特异性细胞毒性T细胞 胃癌细胞系 |
| 收稿时间： | 8/5/2012 1:28:07 PM |
| 修稿时间： | 2012/8/22 0:00:00 |
Efficient induction of specific cytotoxic T lymphocytes specific to a kind of modified survivin peptide which has restricted cytotoxicity against gastric cancer cell lines in vitro |
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| sunting,weilimei and dinggang.Efficient induction of specific cytotoxic T lymphocytes specific to a kind of modified survivin peptide which has restricted cytotoxicity against gastric cancer cell lines in vitro[J].Science Technology and Engineering,2012,12(35):9461-9465. |
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| Authors: | sunting weilimei and dinggang |
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| Institution: | (Yidu Central Hospital,Qingzhou 261000,P.R.China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | survivin modified peptide HLA-A2 PBMCs specific CTLs gastric cancer cell lines |
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