HPV16、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体的构建 |
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作者姓名: | 陈富强 邓金桂 兰新平 孙业红 李体远 |
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作者单位: | 暨南大学附属第二医院深圳市人民医院临床医学研究中心,广东,深圳,518020;暨南大学附属第二医院深圳市人民医院临床医学研究中心,广东,深圳,518020;暨南大学附属第二医院深圳市人民医院临床医学研究中心,广东,深圳,518020;暨南大学附属第二医院深圳市人民医院临床医学研究中心,广东,深圳,518020;暨南大学附属第二医院深圳市人民医院临床医学研究中心,广东,深圳,518020 |
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基金项目: | 深圳市卫生局重点课题 |
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摘 要: | 目的:构建一种含人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体.方法:PCR扩增HPV16型、18型E6、E7基因,克隆到pSC-A载体中,通过定点突变方法,分别构建成含E6/E7融合基因的质粒,即pSC-A.HPV16 E6/E7和pSC-A-HPV18 mE6/E7,并将二者连接成载体pSC-A-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E(pSC-T,HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7:T),最后以痘苗病毒表达载体pJ38为转移载体,构建质粒pJ38-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7(pJ38-T),对所有重组质粒进行酶切鉴定和测序分析.结果:E6/E7融合基因成功克隆到pJ38上.结论:成功构建表达HPV E6/E7融合基因重组痘苗病毒载体,为研制宫颈癌治疗性疫苗奠定基础.
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关 键 词: | 人乳头瘤病毒16、18型 基因克隆 定点突变 E6/E7融合基因 痘苗病毒表达载体 |
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