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一种新型的构建CRISPR/Cas9 KnockOut载体的方法
引用本文:
陈恒玲,许 杰,黄玉连,林显光.一种新型的构建CRISPR/Cas9 KnockOut载体的方法[J].中南民族大学学报(自然科学版),2018(3):68-71.
作者姓名:
陈恒玲
许 杰
黄玉连
林显光
作者单位:
中南民族大学生物医学工程学院
基金项目:
国家自然科学基金资助项目(31500996)
摘 要:
利用CRISPR/Cas9系统这一基于细菌核酸酶Cas9的新型基因编辑工具,可以在原核细胞和真核细胞中实现基因敲除的功能.首先使用CRISPR设计工具设计靶点,退火来制备sgRNA双链,用Bsm BⅠ酶切割gRNA质粒,构建Lenti CRISPRv2的重组质粒.通过U6启动子上的LKO1.5引物对每个菌落序列进行了测序验证,结果表明利用此新方法可以成功构建CRISPR/Cas9系统的Knock Out载体.
关 键 词:
CRISPR/cas9
系统
基因敲除
载体构建
Spata49
A Novel Method for KnockOut Vector Constraction of CRISPR/Cas9 System
Abstract:
Keywords:
CRISPR /Cas9 system
KnockOut
vector construction
Spata49
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