| 表达人胰岛素前体的毕赤酵母菌株的构建 |
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| 引用本文： | 李军,陈劲春,李江,邹保华,吴为华,孙悦. 表达人胰岛素前体的毕赤酵母菌株的构建[J]. 北京化工大学学报(自然科学版), 2004, 31(2): 21-23 |
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| 作者姓名： | 李军 陈劲春 李江 邹保华 吴为华 孙悦 |
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| 作者单位： | 北京化工大学化学工程学院,北京,100029;北京化工大学化学工程学院,北京,100029;北京化工大学化学工程学院,北京,100029;北京化工大学化学工程学院,北京,100029;北京化工大学化学工程学院,北京,100029;北京化工大学化学工程学院,北京,100029 |
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| 摘 要： | 将人胰岛素前体 (HIP)基因插入到毕赤酵母Pichiapastoris的分泌表达质粒pPIC9K中,得到分泌表达质粒pPIC9K/HIP并用电转化法转化P.pastorisGS115。筛选出整合型His+Muts 菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子。经诱导培养后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证明HIP在毕赤酵母中能有效分泌表达。对毕赤酵母中外源基因的稳定性进行了研究,结果表明外源基因在毕赤酵母中很稳定.
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| 关 键 词： | 人胰岛素前体 毕赤酵母 高拷贝 稳定性 |
| 收稿时间： | 2003-06-01 |
| 修稿时间： | 2003-06-01 |
Construction of recombinant HIP Pichia pastoris strains |
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| Li Jun Chen Jin chun LI Jiang Zou Bao hua Wu Wei hua Sun Yue. Construction of recombinant HIP Pichia pastoris strains[J]. Journal of Beijing University of Chemical Technology, 2004, 31(2): 21-23 |
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| Authors: | Li Jun Chen Jin chun LI Jiang Zou Bao hua Wu Wei hua Sun Yue |
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| Affiliation: | College of Chemical Engineering,Beijng University of Chemical Technology, Beijing 100029, China |
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| Abstract: | The human insulin precursor (HIP) gene was inserted into the plasmid pPIC9K of Pichia pastoris to obtain secretory plasmid pPIC9K/HIP.After electroporation of Pichia pastorisGS115(His -Mut ),some high copy transformants (His Mut s) were picked up by G418.SDS PAGE analysis indicated the efficient expression and secretion of HIP. The stability of HIP gene in the recombinant Pichia pastoris was studied and the results showed that the recombinant plasmid had good stability in Pichia pastoris. |
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| Keywords: | human insulin precursor Pichia pastoris high copy stability |
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