| 构建重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1及在胃癌细胞SGC-7901中的表达 |
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| 引用本文： | 朱丽红,毕伟,陆大祥,谭宇蕙,杜标炎,李杰芬.构建重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1及在胃癌细胞SGC-7901中的表达[J].暨南大学学报,2010,31(6). |
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| 作者姓名： | 朱丽红 毕伟 陆大祥 谭宇蕙 杜标炎 李杰芬 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并观察其在人胃癌细胞SGC-7901中的表达及对SGC-7901活性的影响.方法:通过RT-PCR法扩增不可降解CyclinB1(ND CyclinB1),将其插入到pEGFP-N1载体的XhoⅠ和BamHⅠ酶切位点,构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并以PCR、双酶切、测序鉴定.通过脂质体法转染胃癌细胞SGC-7901,进行荧光检测、Western blotting分析和流式细胞仪分析.结果:PCR、酶切及测序证明重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1构建成功.转染胃癌细胞SGC-7901 24 h后,荧光显微镜下观察到绿色荧光.Western blotting检测到CyclinB1的表达明显增加.流式细胞仪检测重组质粒细胞组凋亡指数高于对照组,差异有显著性.结论:成功构建pEGFP-N1-ND CyclinB1荧光真核表达载体,并可在SGC-7901细胞中有效表达.
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| 关 键 词： | 不可降解CyclinB1 细胞周期蛋白 绿色荧光蛋白 细胞周期 肿瘤 |
Construction of the eukaryotic expression vector pEGFP-N1-ND CyclinB1and its expression in SGC-7901 cells |
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| ZHU Li-hong,BI Wei,LU Da-xiang,TAN Yu-hui,DU Biao-yan,LI Jie-fen.Construction of the eukaryotic expression vector pEGFP-N1-ND CyclinB1and its expression in SGC-7901 cells[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2010,31(6). |
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| Authors: | ZHU Li-hong BI Wei LU Da-xiang TAN Yu-hui DU Biao-yan LI Jie-fen |
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