| 短小芽孢杆菌基因无痕修饰系统的建立及应用 |
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| 引用本文： | 张长斌,徐云帆,李茜,覃佳,王海燕. 短小芽孢杆菌基因无痕修饰系统的建立及应用[J]. 四川大学学报(自然科学版), 2019, 56(3): 544-552 |
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| 作者姓名： | 张长斌 徐云帆 李茜 覃佳 王海燕 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划（2012AA022204） |
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| 摘 要： | 为了实现对短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)SCU11基因组连续地无痕改造,提高碱性蛋白酶产量,本文建立了基于Upp基因反向筛选的短小芽孢杆菌基因无痕修饰系统,将碱性蛋白酶基因AprE的1份拷贝无痕插入至短小芽孢杆菌染色体16S rDNA区.摇瓶发酵实验显示,突变菌株碱性蛋白酶活最高达到7125 U/mL,与出发菌株相比提高了33.1%.结果表明利用该系统可实现对短小芽孢杆菌基因组的无痕修饰,对AprE插入突变菌株进行双交换筛选的最终效率约为23.07%.
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| 关 键 词： | 短小芽孢杆菌 无痕修饰 反向筛选 碱性蛋白酶 |
| 收稿时间： | 2018-04-24 |
| 修稿时间： | 2018-05-03 |
Establishment and application of a markerless genetic modification system in Bacillus pumilus |
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| ZHANG Chang-Bin,XU Yun-Fan,LI Xi,QIN Jia and WANG Hai-Yan. Establishment and application of a markerless genetic modification system in Bacillus pumilus[J]. Journal of Sichuan University (Natural Science Edition), 2019, 56(3): 544-552 |
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| Authors: | ZHANG Chang-Bin XU Yun-Fan LI Xi QIN Jia WANG Hai-Yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus pumilus Markerless modification Counter selection Alkaline protease |
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