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短小芽孢杆菌基因无痕修饰系统的建立及应用
引用本文:张长斌,徐云帆,李茜,覃佳,王海燕.短小芽孢杆菌基因无痕修饰系统的建立及应用[J].四川大学学报(自然科学版),2019,56(3):544-552.
作者姓名:张长斌  徐云帆  李茜  覃佳  王海燕
作者单位:四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室
基金项目:国家高技术研究发展计划(2012AA022204)
摘    要:为了实现对短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)SCU11基因组连续地无痕改造,提高碱性蛋白酶产量,本文建立了基于Upp基因反向筛选的短小芽孢杆菌基因无痕修饰系统,将碱性蛋白酶基因AprE的1份拷贝无痕插入至短小芽孢杆菌染色体16S rDNA区.摇瓶发酵实验显示,突变菌株碱性蛋白酶活最高达到7125 U/mL,与出发菌株相比提高了33.1%.结果表明利用该系统可实现对短小芽孢杆菌基因组的无痕修饰,对AprE插入突变菌株进行双交换筛选的最终效率约为23.07%.

关 键 词:短小芽孢杆菌    无痕修饰    反向筛选    碱性蛋白酶
收稿时间:2018/4/24 0:00:00
修稿时间:2018/5/3 0:00:00

Establishment and application of a markerless genetic modification system in Bacillus pumilus
ZHANG Chang-Bin,XU Yun-Fan,LI Xi,QIN Jia and WANG Hai-Yan.Establishment and application of a markerless genetic modification system in Bacillus pumilus[J].Journal of Sichuan University (Natural Science Edition),2019,56(3):544-552.
Authors:ZHANG Chang-Bin  XU Yun-Fan  LI Xi  QIN Jia and WANG Hai-Yan
Abstract:
Keywords:Bacillus pumilus  Markerless modification  Counter selection  Alkaline protease
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