噬菌体展示技术筛选布鲁氏菌OMP25特异性结合肽 |
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作者姓名: | 张亚丽 陈创夫 黄小强 张科 张璘 李永祥 王远志 |
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作者单位: | 石河子大学医学院;石河子大学医学院第一附属医院;石河子大学动物科技学院;新疆福科油品股份有限公司; |
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基金项目: | 国家973资助项目(2010CB530203);国家科技支撑计划资助项目(2013BAI05B05);国家自然科学基金资助项目(31060334,30800813) |
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摘 要: | 利用噬菌体展示技术和ELISA筛选与布鲁氏菌外膜蛋白OMP25结合的七肽分子.将纯化的OMP25-32a包被于聚乙烯板上,对随机噬菌体七肽库进行4轮筛选后挑取噬菌体克隆,ELISA鉴定噬菌体克隆对OMP25-32a的亲和力和特异性.并将阳性噬菌体克隆扩增、测序、获得多肽氨基酸序列,生物信息分析筛选出特异的环形七肽分子.结果从噬菌体七肽库中筛选出42个噬菌体阳性克隆,测序翻译得到对应的42个环形七肽分子;ELISA结果表明,42个噬菌体中9#、11#、35#、38#和41#与融合蛋白OMP25-32a具有较强的亲和性;生物信息学分析42个环形七肽分子中11#环形七肽与锌指蛋白ZNF446有高度同源性.筛选获得了与布鲁氏菌外膜蛋白OMP25相互作用的环形七肽分子LT-7C,为进一步研究抗布鲁氏菌病的药物治疗提供科学依据.
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关 键 词: | 筛选 QMP25 噬菌体展示技术 |
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