| 斑马鱼hand2基因的克隆、抗体制备及分析 |
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| 引用本文： | 朱婷,黄文,王跃群,李永青,袁婺洲,莫小阳,万永奇,吴秀山,邓云. 斑马鱼hand2基因的克隆、抗体制备及分析[J]. 湖南师范大学自然科学学报, 2010, 33(1) |
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| 作者姓名： | 朱婷 黄文 王跃群 李永青 袁婺洲 莫小阳 万永奇 吴秀山 邓云 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,中国,长沙,410081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，湖南省教育厅优秀青年项目 |
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| 摘 要： | 为利用斑马鱼动物模型进一步研究bHLH转录因子家庭重要成员hand2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼hand2基因.将所得片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并通过IPTG诱导表达出GST-Hand2融合蛋白,经GST亲和层析法纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,利用western blotting和免疫组化的方法对抗体进行分析.分析表明:斑马鱼hand2基因成熟肽编码区含有627 bp,编码208个氨基酸,与人Hand2蛋白的同源性达到83%;IPTG诱导表达后,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,经GST纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带.融合蛋白相对分子质量约为49 000.分析表明,制备的抗体具有很好的特异性.
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| 关 键 词： | 斑马鱼 原核表达 多克隆抗体 |
Cloning and Polyclonal Antibody Preparation of hand2 Gene in Zebrafish |
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| ZHU Ting,HUANG Wen,WANG Yue-qun,LI Yong-qing,YUAN Wu-zhou,MO Xiao-yang,WAN Yong-qi,WU Xiu-shan,DENG Yun. Cloning and Polyclonal Antibody Preparation of hand2 Gene in Zebrafish[J]. Journal of Natural Science of Hunan Normal University, 2010, 33(1) |
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| Authors: | ZHU Ting HUANG Wen WANG Yue-qun LI Yong-qing YUAN Wu-zhou MO Xiao-yang WAN Yong-qi WU Xiu-shan DENG Yun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hand2 |
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