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对硝基酚磷酸酶的原核表达、纯化及性质研究
引用本文:李继喜,冯从经,季朝能,李晔华,杨歧生,田亮,谢毅,毛裕民.对硝基酚磷酸酶的原核表达、纯化及性质研究[J].复旦学报(自然科学版),2003,42(4):584-587.
作者姓名:李继喜  冯从经  季朝能  李晔华  杨歧生  田亮  谢毅  毛裕民
作者单位:1. 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;浙江大学,生命科学学院,杭州,310027
2. 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433
3. 浙江大学,生命科学学院,杭州,310027
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30070161),上海市青年科技启明星计划资助项目(01QA14018)
摘    要:克隆到脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus中的对硝基酚磷酸酶(p-nitrophenylphosphatase,pNPPase)基因,将其编码区eDNA连接到pQE30表达载体中,在E.coli M15中经IPTG诱导得到高效表达.用Ni-NTA Superflow层析柱对表达产物进行了分离纯化,初步测定了pNPPase的酶学性质.发现它的反应最适pH是10.0,最适反应温度是55℃,热稳定性Tm值为52℃,Mg^2 、Mn^2 和Co^2 对pNPPase的活性有一定的促进作用,而Zn^2 和Ni^2 对pNPPase没有影响.纯化后其比活为120U/mg.

关 键 词:pNPPase  表达  纯化  酶学性质
文章编号:0427-7104(2003)04-0584-04

Expression,Purification and Characterization of p-Nitrophenylphosphatase
Abstract:
Keywords:pNPPase  expression  purification  enzymology property
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