对硝基酚磷酸酶的原核表达、纯化及性质研究 |
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引用本文: | 李继喜,冯从经,季朝能,李晔华,杨歧生,田亮,谢毅,毛裕民. 对硝基酚磷酸酶的原核表达、纯化及性质研究[J]. 复旦学报(自然科学版), 2003, 42(4): 584-587 |
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作者姓名: | 李继喜 冯从经 季朝能 李晔华 杨歧生 田亮 谢毅 毛裕民 |
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作者单位: | 1. 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;浙江大学,生命科学学院,杭州,310027 2. 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433 3. 浙江大学,生命科学学院,杭州,310027 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30070161),上海市青年科技启明星计划资助项目(01QA14018) |
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摘 要: | 克隆到脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus中的对硝基酚磷酸酶(p-nitrophenylphosphatase,pNPPase)基因,将其编码区eDNA连接到pQE30表达载体中,在E.coli M15中经IPTG诱导得到高效表达.用Ni-NTA Superflow层析柱对表达产物进行了分离纯化,初步测定了pNPPase的酶学性质.发现它的反应最适pH是10.0,最适反应温度是55℃,热稳定性Tm值为52℃,Mg^2 、Mn^2 和Co^2 对pNPPase的活性有一定的促进作用,而Zn^2 和Ni^2 对pNPPase没有影响.纯化后其比活为120U/mg.
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关 键 词: | pNPPase 表达 纯化 酶学性质 |
文章编号: | 0427-7104(2003)04-0584-04 |
Expression,Purification and Characterization of p-Nitrophenylphosphatase |
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Abstract: | |
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Keywords: | pNPPase expression purification enzymology property |
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