鹅源腺病毒全基因组DNA酶切片段的克隆 |
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作者姓名: | 徐福洲 崔治中 段玉友 刘岳龙 孙怀昌 何良梅 |
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作者单位: | 1. 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 2. 扬州大学畜牧兽医学院动物医学系, |
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基金项目: | 国家"863"高新技术发展研究计划(19601002) |
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摘 要: | 利用1株鹅源腺病Y81G4株,经鹅胚增殖后收获尿囊液,用差速离心法纯化病毒子并提取病毒基因组DNA,病毒DNA经Hind Ⅲ酶切后共产生10个片段,分别回收各酶切片段,与经Hind Ⅲ单酶切的pUC18连续,获得8个不同的重组质粒。对于未克隆到的两末端片段,经碱处理去除末端蛋白后,以平端和HindⅢ粘端与经SmaⅠ和 HindⅢ双酶切的pUC18连接,获得了重组质粒pGAHC和pGAHI。克隆的各酶切片段,通过酶切电泳和Southern blotting结果鉴定,证明已分别克隆到该病毒基因组DNA HindⅢ酶切片段,且各酶切片段大小之和约为32.9kb.
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关 键 词: | 鹅源腺病毒 基因组 酶切片段 克隆 |
文章编号: | 1007-824X(2001)01-0044-04 |
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