| 人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定 |
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| 引用本文： | 耿梅,陈清,徐丽慧,张延亭,何贤辉.人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定[J].暨南大学学报,2010,31(4). |
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| 作者姓名： | 耿梅 陈清 徐丽慧 张延亭 何贤辉 |
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| 作者单位： | 1. 暨南大学,生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心,广东,广州,510632;暨南大学,再生医学教育部重点实验室,广东,广州,510632
2. 暨南大学,生命科学技术学院生物工程研究所,广东,广州,510632 |
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| 摘 要： | 目的:构建重组人白细胞介素7(rhIL-7)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并鉴定.方法:以RT-PCR方法扩增编码IL-7的cDNA片段,插入至pET-3d载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3),优化rhIL-7表达条件,利用免疫印迹鉴定重组蛋白.结果:重组载体经DNA测序显示包含正确的rhIL-7编码序列,重组载体转入大肠杆菌后,经IPTG诱导后外源蛋白表达,相对分子质量为17 400,与IL-7理论分子质量一致;免疫印迹显示,外源蛋白可以被人IL-7特异性抗体识别,表明在原核表达的外源蛋白是rhIL-7.rhIL-7主要表达于包涵体中,包涵体表达优化条件为:温度为37 ℃、IPTG浓度为0.4 mmol/L、诱导时间为4 h.结论:成功的构建了rhIL-7的原核表达载体.
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| 关 键 词： | 白细胞介素7 原核表达载体 包涵体表达 免疫印迹 |
Expression and identification of recombinant human interleukin 7 product in Escherichia coli |
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| GENG Mei,CHEN Qing,XU Li-hui,ZHANG Yan-ting,HE Xian-hui.Expression and identification of recombinant human interleukin 7 product in Escherichia coli[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2010,31(4). |
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| Authors: | GENG Mei CHEN Qing XU Li-hui ZHANG Yan-ting HE Xian-hui |
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