SARS-CoV-2非结构蛋白Nsp2上调A549细胞泛素水平并被泛素化修饰研究 |
| |
引用本文: | 游强,张红,宗珊,汪圆松,王承海,李卫玲,孙宾莲,乔嘉璐.SARS-CoV-2非结构蛋白Nsp2上调A549细胞泛素水平并被泛素化修饰研究[J].江汉大学学报(自然科学版),2023(2):27-34. |
| |
作者姓名: | 游强 张红 宗珊 汪圆松 王承海 李卫玲 孙宾莲 乔嘉璐 |
| |
作者单位: | 江汉大学医学部武汉生物医学研究院 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(31670167);;江汉大学博士启动基金项目(2019037,6210035); |
| |
摘 要: | 目的 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)因其强大的感染力肆虐全球,因此深入研究病毒与宿主的相互作用是揭示SARS-CoV-2致病机制的重要途经。方法 利用同源重组方法 将SRAS-CoV-2的非结构蛋白Nsp1~Nsp16构建到真核表达载体上,并通过Western blot检测Nsp1~Nsp16重组质粒的蛋白表达情况。接着使用Western blot检测Nsp2对细胞总泛素水平的影响,并通过细胞免疫荧光检测Nsp2在细胞中的分布情况。最后通过免疫共沉淀技术对Nsp2与泛素之间的相互作用关系进行检测。结果 Western blot检测显示Nsp1~Nsp16重组质粒能够在A549细胞中正常表达;筛选发现非结构蛋白Nsp2能在细胞质中上调细胞总泛素表达水平;免疫共沉淀检测进一步发现Nsp2能与泛素蛋白发生相互作用。结论 成功构建了SARS-CoV-2非结构蛋白Nsp1~Nsp16真核细胞表达载体,并发现非结构蛋白Nsp2可以增加细胞总泛素表达水平并被泛素化修饰。提示Nsp2通过泛素途径参与到SARS-CoV-2与宿主的相互作用,有助于深入了解病毒与宿主的作用机制。
|
关 键 词: | SARS-CoV-2 非结构蛋白 Nsp2 泛素 |
|
|