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D-半乳糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞衰老
作者姓名:吉瑞瑞  张健  王士雯  廖旭东  陈兰英
作者单位:1. 中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所,阜外心血管病医院,北京,100037
2. 中国人民解放军总医院老年心血管研究所,北京,100853
基金项目:国家重点基础研究发展规划(批准号: G2000057004),国家自然科学基金(批准号: 30170400)资助项目.
摘    要:探讨了D-半乳糖(D-galactose, D-gal)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)衰老与细胞凋亡的关系. 以含D-gal(10 g/L)DMEM培养液培养PMVECs, 经内皮细胞鉴定后, 再通过下述鉴定建立了大鼠PMVECs衰老模型: (1) 约90%的细胞呈现b-半乳糖苷酶活性阳性染色; (2) 流式细胞仪检测可见细胞周期分布变化, 90%细胞停留在G0/G1期, 而S期和G2/M期细胞近于消失. 与未诱导的对照组细胞比较得到如下结果: (1) 荧光显微镜和透射电子显微镜观察, 可见D-gal诱导的PMVECs细胞核染色质浓缩和凝聚, 并可见凋亡小体; (2) 流式细胞仪检测Annexin V /PI双染色的D-gal诱导的PMVECs中, 早中期凋亡细胞明显增加, 其细胞凋亡率为(39.8±2.8)% (对照组为(14.0±3.7)%); (3) PMVECs在衰老终末阶段出现典型的晚期凋亡亚二倍体峰. 实验表明: D-gal可诱导体外培养的PMVECs老化, 从而复制细胞衰老. 经D-gal诱导的衰老PMVECs易发生凋亡, 提示细胞凋亡参与了D-gal诱导细胞衰老的过程.

关 键 词:D-半乳糖  肺微血管内皮细胞  细胞衰老  细胞凋亡
收稿时间:2002-08-20
修稿时间:2002-08-20
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