| 苜蓿花叶病毒复制酶基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 张竞秋,哈斯阿古拉,张丽,张鹤龄.苜蓿花叶病毒复制酶基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建[J].内蒙古大学学报(自然科学版),2003,34(5):536-541. |
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| 作者姓名： | 张竞秋 哈斯阿古拉 张丽 张鹤龄 |
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| 作者单位： | 内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39860042) |
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| 摘 要： | 以侵染苜蓿的苜蓿花叶病毒中国分离株(Alfalfa mosaic virus Chinese isolate，A1MV—Ch)RNA2为模板，利用人工合成的特异性引物，进行反转录及PCR扩增，分两段分别扩增了复制酶基因的5′端1．32kb和3′端及其非编码区的1．23kb cDNA序列．用限制性内切酶切割PCR产物后，与pUCl9重组，转化大肠杆菌DH5α，筛选重组质粒，用限制性内切酶分析及PCR鉴定，得到分别含有5′端序列和3′端序列的重组质粒。已由上述两种重组质粒构建了含有完整复制酶基因的重组质粒．进行了全序列测定，并与国外报道的A1MV-425株系的相应序列相比较，其复制酶基因编码区核苷酸序列同源性达97．8％，推测的氨基酸序列的同源性达97．6％，3′端非编码区核苷酸序列同源性为98．2％．并将全长复制酶基因与植物表达载体pROKⅡ重组，得植物转化载体pAlMV—FL．
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| 关 键 词： | 苜蓿花叶病毒 复制酶基因 核苷酸序列 分子克隆 |
| 文章编号： | 1000-1638(2003)05-0536-06 |
| 修稿时间： | 2002年10月17 |
Molecular Cloning and Nucleotide Sequence of Replicase Gene from Alfalfa Mosaic Virus Chinese Isolate |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | alfalfa mosaic virus replicase gene nucleotide sequence molecular cloning |
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