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猪表皮生长因子在大肠杆菌中的串联表达
作者姓名:贺超  邓璐  汤承  岳华
作者单位:西南民族大学生命科学与技术学院
基金项目:国家“863计划”课题(2012AA101304);四川省教育厅创新团队(13TD0060)
摘    要:根据Gen Bank中猪表皮生长因子(p EGF)基因信息设计引物,通过PCR、亚克隆、基因重组等技术,构建得到p EGF拷贝数分别为1、2、3的原核重组表达质粒.用重组质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,在37℃诱导条件下,1、2、3拷贝p EGF重组质粒均能表达p EGF蛋白,灰度值分析表明:表达的融合蛋白占菌体蛋白总量分别为9.54%、20.37%、26.79%,表明在原核表达中,对p EGF进行同向串联,增加其拷贝数,可以提高p EGF在表达后融合蛋白中所占比例,相应提高p EGF蛋白产量.本研究为p EGF重组蛋白的高效表达和批量生产提供可靠的依据.

关 键 词:猪表皮生长因子  亚克隆  诱导表达
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