拟南芥Pro:RFE6-GUS载体的构建及其转基因植株的筛选

重金属污染主要来自于工业和农业废水的排放，而重金属对生物往往造成不可逆的伤害，重金属镉便是其中一种。为探究镉胁迫对拟南芥AtRFE6基因表达的影响，文章以哥伦比亚背景(Columbia, Col)的拟南芥为实验材料，构建拟南芥Pro:RFE6-GUS转基因植株。以野生型拟南芥DNA为模板，扩增AtRFE6启动子片段，并对该启动子和GUS质粒进行双酶切和连接；然后将重组质粒热转入大肠杆菌DH5α进行鉴定和测序，测序正确的质粒转入农杆菌，并侵染野生型拟南芥；对筛选获得的转基因植株进行镉胁迫处理并GUS染色，结果表明拟南芥在受到镉胁迫时，AtRFE6基因的表达量增加，说明AtRFE6可能参与调节植物对镉胁迫的响应。