一种基于细胞测定维生素K环氧化物还原酶活性的方法 |
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作者姓名: | 徐亚奇 王一伊 李飞 邱稳辉 沈滟 沈国民 |
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作者单位: | 河南科技大学基础医学院,河南洛阳471023;河南科技大学基础医学院,河南洛阳471023;河南省血栓与止血国际联合实验室,河南洛阳471023 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(82170133;81770140);;河南省科技攻关项目(212102310629;212102310877); |
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摘 要: | 维生素K环氧化物还原酶(VKOR)是开发抗凝药的重要靶点,其活性测定对鉴定靶向VKOR新型抑制剂具有重要的应用价值.目前测定VKOR活性的常用方法为基于报告基因的方法,是一种间接测定VKOR活性的方法,不能用于鉴定靶向VKOR新型抑制剂.为建立一种快速、直接测定VKOR活性的方法,首先建立了一种基于HPLC检测维生素K(VK)和维生素K环氧化物(VKO)的方法,该方法简便快速,准确性高,重复性好,各检测物色谱峰分离良好.在此基础上,利用GGCX基因敲除的细胞,建立了直接测定细胞内VKOR活性的方法,更加便捷地鉴定靶向VKOR抑制剂,为研发靶向VKOR新型抗凝药提供帮助.
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关 键 词: | 维生素K环氧化物还原酶 高效液相色谱 维生素K 维生素K环氧化物 华法林 |
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