人载脂蛋白基因apoAⅠ在毕赤氏酵母中的胞内表达 |
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作者姓名: | 杨婷婷 赵志安 张彦 宋大新 |
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作者单位: | 复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,上海,200433 |
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基金项目: | 复旦大学Med X基金重点资助项目,上海市科学技术委员会资助项目(024319204) |
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摘 要: | 将PCR扩增得到的apoAⅠ基因片段插入胞内表达质粒pPIC3.5K,重组的pPIC3.5K apoAⅠ用BglⅡ酶切后,转化PichiapastorisGS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,再通过PCR鉴定证实apoAⅠ基因已整合到染色体上.其转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导,收集细胞裂解后,用SDS PAGE与Westernblotting检测,证明胞内有明显的rApoAⅠ表达,其分子质量与人血浆提取的ApoAⅠ相同.
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关 键 词: | 人载脂蛋白ApoAⅠ 胞内表达质粒 毕赤氏酵母 蛋白质印迹 |
文章编号: | 0427-7104(2004)06-1035-04 |
修稿时间: | 2004-03-16 |
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