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粪肠球菌中具有启动功能的DNA片段的捕获及鉴定
引用本文:黄路标,张伯生,任大明.粪肠球菌中具有启动功能的DNA片段的捕获及鉴定[J].复旦学报(自然科学版),2006,45(3):288-292.
作者姓名:黄路标  张伯生  任大明
作者单位:复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433
摘    要:PCR扩增来自质粒pUC119的β-内酰胺酶基因(bla)作报告基因,克隆进质粒pNZ8037上的能被Nisin诱导的启动子PnisA下游,构建了粪肠球菌启动功能片段探测载体pNZ-bla.利用该探测载体从粪肠球菌染色体总DNA中克隆到了能在粪肠球菌中表达的一系列具有启动功能的DNA片段,将包含克隆片段的pNZ-P-bla6质粒电击转化粪肠球菌,培养转化子并检测其抗氨苄强度,结果表明其抗氨苄强度大于Nisin诱导的含pNZ-bla质粒的粪肠球菌.表明克隆的功能片段启动能力强于PnisA.在pNZ-P-bla6的启动功能片段下游Sau3AⅠ和EcoRⅠ之间接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建表达绿色荧光蛋白的质粒载体pNZ-P-gfp并导入粪肠球菌中,共聚焦显微镜下可以观察到绿色荧光蛋白的表达.

关 键 词:乳酸菌  粪肠球菌  启动子  克隆载体  GFP
文章编号:0427-7104(2006)03-0288-05
收稿时间:2006-03-02
修稿时间:2006-03-02

Capture and Characterization of DNA Fragments Containing Promoter Activity of Enterococcus facalis
HUANG Lu-biao,ZHANG Bo-sheng,REN Da-ming.Capture and Characterization of DNA Fragments Containing Promoter Activity of Enterococcus facalis[J].Journal of Fudan University(Natural Science),2006,45(3):288-292.
Authors:HUANG Lu-biao  ZHANG Bo-sheng  REN Da-ming
Institution:State Key Laboratory of Genetic Engineering, Institute of Genetics, School of Life Sciences, Fudan University, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:lactic acid bacteria  Enterococcus facalis  promoter  cloning vector  GFP
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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