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黑曲霉木聚糖酶基因xynB的克隆及在酿酒酵母中的表达
引用本文:张水龙,陈东,曹树威,吴仁智,黄日波.黑曲霉木聚糖酶基因xynB的克隆及在酿酒酵母中的表达[J].广西科学,2013,20(2):148-151,157.
作者姓名:张水龙  陈东  曹树威  吴仁智  黄日波
作者单位:1. 广西大学生命科学与技术学院,广西南宁,530004
2. 广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室,国家非粮生物质能源工程技术研究中心,广西生物炼制重点实验室,广西南宁 530007
3. 广西大学生命科学与技术学院,广西南宁 530004;广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室,国家非粮生物质能源工程技术研究中心,广西生物炼制重点实验室,广西南宁 530007
基金项目:国家973项目,国家863项目,国家国际合作项目,广西科学研究与技术开发计划项目,广西科技创新能力与条件建设计划项目,广西自然科学基金项目,广西科学院基本科研业务费项目,八桂学者建设工程专项经费项目资助
摘    要:从黑曲霉(Aspergillus niger)克隆木聚糖酶基因xynB,利用重叠延伸PCR法去除其中的内含子.将该基因与质粒pYES2连接,构建真核表达载体,用醋酸锂化转法导人酿酒酵母(Sacharom yces cerevisiae)INVSC1菌株表达.利用α信号肽替换基因原信号肽,以考察信号肽对表达蛋白分泌的影响.结果获得2株重组菌株,分别为xynB连接原信号肽的pYES2-xynB菌株和xynB连接α信号肽的pYES2-xynB-α菌株.木聚糖酶B成功表达,SDS-PAGE检测到约24kDa目的蛋白质条带.木聚糖酶B最适催化温度为50℃,最适催化pH值为5.0,Mn2+对酶活具有强烈的抑制作用.将α信号肽取代原信号肽使酶活达到最高的诱导时间由72h缩短为48h,但是置换信号肽使最高酶活由7.59U降低为3.97U.

关 键 词:木聚糖酶  黑曲霉  酿酒酵母
收稿时间:2013/3/6 0:00:00
修稿时间:2013/3/28 0:00:00

Cloning of xynB Gene Encoding Xylanase B from Aspergillus niger and Expression in Sacharomyces cerevisiae
ZHANG Shui-long,CHEN Dong,CAO Shu-wei,WU Ren-zhi and HUANG Ri-bo.Cloning of xynB Gene Encoding Xylanase B from Aspergillus niger and Expression in Sacharomyces cerevisiae[J].Guangxi Sciences,2013,20(2):148-151,157.
Authors:ZHANG Shui-long  CHEN Dong  CAO Shu-wei  WU Ren-zhi and HUANG Ri-bo
Institution:Life Science and Technology College, Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China,State Key Laboratory of Non-Food Biomass and Enzyme Technology, National Engineering Research Center for Non-Food Biorefinery, Guangxi Academy of Science, Guangxi Key Laboratory of Biorefinery, Nanning, Guangxi, 530007, China,Life Science and Technology College, Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China,State Key Laboratory of Non-Food Biomass and Enzyme Technology, National Engineering Research Center for Non-Food Biorefinery, Guangxi Academy of Science, Guangxi Key Laboratory of Biorefinery, Nanning, Guangxi, 530007, China and Life Science and Technology College, Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China;State Key Laboratory of Non-Food Biomass and Enzyme Technology, National Engineering Research Center for Non-Food Biorefinery, Guangxi Academy of Science, Guangxi Key Laboratory of Biorefinery, Nanning, Guangxi, 530007, China
Abstract:
Keywords:xylanase B  Aspergillus niger  Saccharomyces cerevisiae
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