产气肠杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆和表达 |
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作者姓名: | 苟帮超 叶盛 李维 杨玉 |
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作者单位: | 四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066;四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066;四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066;四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066 |
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基金项目: | 四川省青年基金;四川省教育厅自然科学基金 |
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摘 要: | 根据已知的α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactatedecarboxylase,ALDC,EC.4.1.1.5)基因序列,利用PCR方法从产气大肠杆菌(Enterobacter aerogenes)中克隆到0.8kb的DNA片段,经DNA序列分析表明该DNA片段为ALDC基因.将该片段插入到原核表达载体pBV220中,获得表达质粒pBVEDAD,转化大肠杆菌DH5α(Escherichia coli),经热诱导后,通过SDS-PAGE分析和酶活测定,结果表明ALDC获得了高效表达.重组细胞表达的ALDC酶活是出发菌产气肠杆菌(Eaerogenes)的1100倍.DH5α(pBVEDAD)在无选择压力下37℃连续培养60代,在42℃下热诱导5h未见质粒丢失.
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关 键 词: | 产气肠杆菌 α-乙酰乳酸脱羧酶 基因克隆 表达 |
文章编号: | 1001-8395(2006)06-0739-04 |
收稿时间: | 2005-10-19 |
修稿时间: | 2005-10-19 |
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