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产气肠杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆和表达
作者姓名:苟帮超  叶盛  李维  杨玉
作者单位:四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066;四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066;四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066;四川师范大学,生命科学学院,四川,成都,610066
基金项目:四川省青年基金;四川省教育厅自然科学基金
摘    要:根据已知的α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactatedecarboxylase,ALDC,EC.4.1.1.5)基因序列,利用PCR方法从产气大肠杆菌(Enterobacter aerogenes)中克隆到0.8kb的DNA片段,经DNA序列分析表明该DNA片段为ALDC基因.将该片段插入到原核表达载体pBV220中,获得表达质粒pBVEDAD,转化大肠杆菌DH5α(Escherichia coli),经热诱导后,通过SDS-PAGE分析和酶活测定,结果表明ALDC获得了高效表达.重组细胞表达的ALDC酶活是出发菌产气肠杆菌(Eaerogenes)的1100倍.DH5α(pBVEDAD)在无选择压力下37℃连续培养60代,在42℃下热诱导5h未见质粒丢失.

关 键 词:产气肠杆菌  α-乙酰乳酸脱羧酶  基因克隆  表达
文章编号:1001-8395(2006)06-0739-04
收稿时间:2005-10-19
修稿时间:2005-10-19
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